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氟化钠对印度淡水杀幼虫鱼血液参数和过氧化氢酶活性的毒性。

阿伦chauhan1哈普雷特·辛格1还有拉胡尔·辛格1*

1帕格瓦拉洛夫利专业大学生物技术与生物科学学院动物学系,印度旁遮普144411

DOI:http://dx.doi.org/10.12944/CWE.9.3.48

由于其高反应性,氟化物在自然界中不以元素态存在。世卫组织和ISO 10500建议,饮用水中的氟化物含量应在1.0-1.5 ppm范围内。氟离子对水生生物有直接毒性,并在吸收率超过排泄率的组织中积累。暴露时间也会影响毒性。蛇头鱼(鲤鱼是印度和东南亚的食性和可食性鱼类。经观察,暴露于NaF (60ppm)后,体重和脏体指数显著下降。部分白细胞减少,中性粒细胞减少1.125 ~ 2.68%,单核细胞减少0.66% ~ 35.66%。淋巴细胞升高2.9 ~ 10.01%,嗜酸性粒细胞升高7.6 ~ 20.88%。Hb%也有所下降。在对过氧化氢酶活性进行估计后发现,肝脏过氧化氢酶活性的增加可能与氧化应激的增加有关。脑组织过氧化氢酶活性降低0.03% ~ 9.23%。

氟化钠;鲤鱼striatus;白细胞;过氧化氢酶

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肖汉,辛格H,辛格R.氟化钠对印度淡水杀幼虫鱼血液参数和过氧化氢酶活性的毒性。当代世界环境2014;9 (3)DOI:http://dx.doi.org/10.12944/CWE.9.3.48

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收到: 2014-06-11
接受: 2014-10-14

介绍

由于其高反应性,氟化物在自然界中不以元素态存在。它要么以无机氟化物(包括游离阴离子F)的形式存在,要么以有机氟化物的形式存在。在全球环境中,无机氟化物比有机氟化物丰富得多。无机氟化物的自然来源是风化、火山活动和海洋气溶胶。

世卫组织和ISO 10500建议,饮用水中的氟化物含量应在1.0-1.5 ppm范围内。氟化物自然存在于公共供水系统中,这是含氟岩石风化淋滤和土壤进入地下水的径流的结果。燃煤电厂、农业肥料和工业化(铝、钢和玻璃)排放的含氟气体在大气中的沉降。由于许多工业活动,水生生态系统中氟离子的浓度正在显著增加。氟化钠是一种无味的白色粉末或无色晶体,15℃时水溶性为4%oC.氟离子对水生生物有直接毒性,并在吸收率超过排泄率的组织中积累。它会引起组织病理变化,也会引起氧化应激。暴露时间也会影响毒性。蛇头(鲤鱼straitus是印度和东南亚的食性和可食用鱼类。

材料与方法

共四十种成虫鲤鱼straitus平均长度为5厘米的。重约10克,均来自本地养鱼场。所有个体在实验室条件下驯化21 d。在驯化过程中,用配制好的市场饲料喂养鱼。在适应环境后,鱼被分成两组,每组20只,每组75只。一组暴露在60 ppm NaF的亚致死剂量下20天和40天,每隔一次给药,另一组保持对照组。为了保持水质,每隔一天更换一次水族馆的水。此外这些抗真菌(氟康唑)和抗菌(奥四环素)用于防止细菌感染。每隔一段时间或定期添加活的食物(蠕虫)。

在给药前、第20天和第40天分别记录各组动物体重。体器官指数(Organosomatic index, OSI)由下式计算

OSI= wt. (gm)器官/总体重× 100

为了研究麻醉后鱼的血液学变化,用胰岛素注射器从主静脉采血。薄层色谱采用Neubauer室(Daice and Lewis, 1977)。采用Leishmann染色法研究DLC,方法由Daice和Lewis(1977)提供。用血液计测定Hb%。

用Luck(1977)法记录过氧化氢酶活性。3.0 ml反应混合物(50ml磷酸钾缓冲液- pH值7,1.25× 10-2M过氧化氢和适量胞质上清液)在240nm处观察。酶活性单位为µmol H2O2分解minut1毫克1蛋白质。

结果与讨论

NaF处理鱼暴露20天和40天后的体重检测结果显示,与对照组相比,NaF处理鱼的体重分别从6.49%显著下降到18.80%。NaF处理鱼在暴露20天和40天后的脏体指数与对照相比,肝脏和大脑的脏体指数分别从8.1% ~ 16.66%和4.3% ~ 16%显著下降。

NaF处理后20天和40天的总白细胞检测结果显示,与对照组相比,TLC分别从0.13% ~ 5.37%显著升高。

NaF处理后20天和40天的差异白细胞检测显示,与对照组相比,DLC发生了显著变化,中性粒细胞减少1.12% ~ 2.68%,嗜酸性粒细胞增加7.6% ~ 20.88%,单核细胞减少0.66% ~ 35.66%,淋巴细胞增加2.91% ~ 10.01%。在本研究中,随着氟化钠浓度的增加和暴露时间的延长,淋巴细胞和嗜酸性粒细胞增加,而中性粒细胞和单核细胞减少。一些工作者已经报道了化学应激鱼的淋巴细胞数量增加和中性粒细胞的研究下降。(帕沙克等人,2013)。

在接触不同的化学物质后,观察到鱼体内单核细胞和中性粒细胞百分比的下降。(Benerjee等人。2010;井斜等人。2008)。

表:NaF暴露后的机体、血液学及过氧化氢酶活性观察表
鲤鱼straitus

参数

对照组

NaF暴露(60ppm)

0天 20天 40天 0天NaF暴露 20天NaF暴露 40天NaF暴露
体重(克) 33.65±1.04 34.65±0.67 36.90±0.72 33.65±1.14 32.40±0.89 29.96±1.57
Organosomatic指数 0.73±0.03 0.74±0.20 0.78±0.02 0.73±0.03 0.68±0.07 0.65±0.03
大脑 0.23±0.99 0.23±0.02 0.25±0.09 0.23±0.99 0.22±0.06 0.21±0.19
薄层色谱 5375±78.89 5375±81.00 5391±53.91 5375±78.89 5382±79.39 5420±37.81
DLC % 中性粒细胞 35.80±1.41 35.69±1.00 35.89±2.30 35.80±1.41 35.29±2.99 34.73±1.44
嗜酸性粒细胞 2.50±2.12 2.50±1.11 2.49±0.90 2.50±2.12 2.69±1.92 3.01±0.60
单核细胞 1.50±0.71 1.51±2.1 1.57±2.1 1.50±0.71 1.40±0.94 1.01±1.12
淋巴细胞 61.00±1.41 61.00±1.51 61.89±1.44 61.00±1.41 62.78±0.77 68.09±1.14
Hb (g / dl) 8.2±0.66 8.2±0.80 8.21±0.91 8.2±0.66 7.8±1.31 7.2±1.05
过氧化氢酶活性 34.13±1.02 34.13±1.02 34.7±3.7 34.13±1.02 36.90±1.06 37.80±2.75
大脑 13.04±2.8 13.04±1.18 13.80±1.99 13.04±2.8 13.00±2.24 12.52±2.71
血清总蛋白 7.15±1.80 7.75±0.99 7.99±0.87 7.15±1.80 7.15±1.02 6.67±1.35
大脑 2.80±0.67 2.83±1.90 2.99±0.88 2.80±0.80 2.59±0.35 2.64±1.94

氟化物引起的鱼类中性粒细胞减少(中性粒细胞减少27.71%)是由于造血抑制而引起再生障碍性贫血。中性粒细胞减少症是骨髓不能产生足够数量的中性粒细胞的结果,这是由于过度的外周破坏或消耗这些细胞。中性粒细胞减少症通常是由于对一种特定化合物的特异性发展而导致的,这种化合物与白细胞表面结合形成抗原复合物,从而产生能够破坏或破坏循环白细胞及其在骨髓中更成熟的前体的抗体。因此,在本研究中,中性粒细胞减少可能是由于其对造血器官的毒性所致。

氟化物诱导的鱼类单核细胞显著减少是这些细胞在炎症部位运动导致单核细胞减少的结果(Sharma等人。1984)。

NaF处理鱼暴露20天和40天后的血红蛋白百分比检测显示,与对照组相比,Hb%分别从4.87%显著下降到12.30%。贫血似乎是氟化钠的常见影响。贫血可归因于氟化物增加破坏或丧失红细胞和/或抑制红细胞生成,也可能是由于渗透调节紊乱引起的血液扩张。由于组织损伤和随后的细胞碎片清除,白细胞计数增加。白细胞在组织损伤过程中发挥重要作用,通过产生抗体和化学物质刺激造血组织和免疫系统,起到防御作用。

NaF处理鱼20天和40天后肝脏和脑部过氧化氢酶活性检测显示,与对照相比,肝脏过氧化氢酶活性从8.11%到8.9%显著升高,脑部过氧化氢酶活性从0.03%到9.23%显著降低。

暴露20天和40天后,NaF处理鱼的肝脏和大脑检测显示,与对照组相比,肝脏和大脑的总蛋白分别从7.74% ~ 16.40%和8.24% ~ 11.48%显著降低。

与其他组织相比,肝脏活性增加,这与他们的文献一致(Hidalgoet al .,2002;居尔, 2004)。在我们的研究中,氟化钠增加CAT活性可能与氟化钠增加氧化应激有关。在实验室暴露于各种有机和金属污染物中,观察到抗氧化酶活性增加,但不同物种的反应是不同的。在以往的研究中,肝脏是抗氧化应激能力最强的器官,也是抗氧化酶(SOD, CAT)活性最高的单一器官。这可能与肝脏是多重氧化反应和最大自由基生成的场所有关(Gul, 2004;Avci, 2005)。

观察到脑组织中CAT活性的抑制取决于氟化钠的浓度。由于大脑含有大量的不饱和脂质,并且利用了大约20%的身体总需氧量,因此大脑非常容易受到自由基的氧化损伤。虽然CAT在肝脏中非常活跃,但大脑中的抗氧化酶并不特别丰富。结果表明,7种动物的肝脏中CAT活性最高,大脑中CAT活性最低, 1998)。

结论

氟化物摄入超过推荐剂量是有毒物质。它积聚在鳃、肝、脑和肾中。为了对抗它的作用,身体会产生更多的特异性酶和白细胞。

鸣谢

感谢可爱专业大学动物学系的鼓励和提供实验室设施。

参考文献

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