当前世界环境

介绍

目前，农化市场是药品和化学品的一个繁华领域，它由天然产品和天然来源的半合成产品及其衍生的植物和微生物组成^1、2、3。这是因为它对有害生物管理产品的需求不断增加，以通过促进发现和开发由生物构成的新化学品的努力来确保可持续利用¹。我们可以看到，全世界都在广泛生产和使用农药来控制农作物中的各种害虫。自1991年以来，它代表了新杀虫剂新时代的开始，并改善了许多环境问题²，意思是关心保护水生动物，土壤动物和陆地动物。的新型农药的发展策略一直是极低剂量，农药导致防治病虫害和杂草所需的有效成分显著减少，但这些来自天然来源的杀虫剂对非目标生物没有影响，目前尚无研究证据。与作物保护有关的新化学物质仍在不断被报道^4.在本研究中，我们使用了一种新型的杀虫剂，它是一种对危害多种水果、蔬菜和观赏植物的常见蚜虫有良好杀虫活性的杀虫剂，对粉蚧、叶蝉、白蝇也有良好的杀虫活性^3.。以前有报道称嗜核干细胞对鲤属Carpio鱼⁵。

对动物来说，杀虫剂是一种压力源。农药进入水生生态系统，与鱼类和其他生物细胞中的各种靶标相互作用。水生生物中的氧化应激，鱼类是水生毒理学研究中最重要的动物模型。由于氧化应激是由包括一些杀虫剂在内的各种人造化合物引起的，这些外源药物可能会改变鱼体内的抗氧化状态⁶自由基的产生和抗氧化活性的紊乱也会导致氧化应激。

活细胞对活性氧具有高度活跃的酶防御系统，酶的活性因物种和肌肉类型而异⁷。当细胞中的ROS增加时，它会导致ROS的产生和抗氧化防御之间缺乏平衡，从而改变体内的生理过程，最终影响和改变DNA物质⁸。在细胞中，抗氧化防御系统在维持生物体对抗活性氧(ROS)的细胞稳态中起着重要作用，活性氧在细胞内不断被解毒和清除⁹。而且，不同类型的抗氧化剂保护细胞免受损害¹⁰比如维生素E和维生素C，以及已知的对抗它们的抗氧化酶。O氧化应激是由许多化学物质引起的，包括一些农药、有机氯、有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯、联吡啶、三嗪、氯乙酰苯胺和其他农药¹¹，所有这些农药都被证明会引起氧化应激。因此，活性氧是异种生物代谢的典型产物，许多污染物通过活性氧的产生表现出一些毒性¹²并导致DNA损伤和蛋白质合成减少，这可能会导致细胞完整性受损¹³。

鲤鱼鲤属carpio广泛用于水产养殖，也被用作食物来源，由于其整个季节的可持续性和可用性以及对实验室条件的良好适应能力，这种鱼是最佳的水生毒理学模型。因此，到目前为止，对农药对不同鱼类的毒性进行了一些研究。然而，目前还没有关于血液中抗氧化酶的研究鲤属carpio暴露于嗜假肌醇还没有报道。因为动物血液中含有丰富的抗氧化剂，同时也是氧气的转运体，抗氧化剂包括超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和其他抗氧化酶¹⁴。因此，目前的研究旨在突出的生化变化鲤属carpio暴露于嗜假肌。

材料与方法

试验动物及保养

健康的鲤属carpio在一个巨大的水泥缸里，在连续曝气的情况下，装上5000L的自来水。在此期间，提供了商用托盘，并在测试前监测了健康状况。将健康鱼暴露于Afidopyropen中，在整个实验期间，维持氧浓度和光周期12小时的黑暗和12小时的光照。鱼鲤属carpio(平均体长18.18±1.62 cm，平均体重100.64±10.25 g)¹⁵溶解氧:7.8±0.9 mg/L。总硬度-32.2±3.1 mg CaCO3/L。Ph-7.05±0.2。盐度;Nil。特定的重力- 1.001。钙-18.29±1.52 mg/L。镁-0.76±0.3 mg/L。磷酸盐-0.032±0.005 mg/L，氧饱和度为90-98%。温度-26±2℃。

化学测试

从旁遮普马鲁特Garg农业中心采购了杀虫剂嗜虫腈。本研究中使用的其余化学品均从SRL采购。经纪公司。孟买的公司。

实验设计与曝光

实验为半静态实验，持续1、10、20、30天。鱼被分成五组，其中包括在水族馆里的对照组。亚致死浓度按1/5选取^th信用证的条款₅₀价值。将鱼暴露于0.2 mg/L的嗜假腺苷中，在整个实验过程中，对照组和处理组在试验室中保持氧浓度和光周期12小时的黑暗和光照。

样品收集和生化分析

鱼在取样前被饥饿了24小时。采集尾静脉血样，4℃下6000 rpm离心10 min， - 25℃保存备用。使用商用试剂盒在酶标仪上测定CAT、SOD、MDA和GPx活性的生化参数¹⁶(RANSEL by Randox Laboratories, UK)，以国际单位每升表示，MDA以mMol/ml表示。血浆ALT、GGT和ALP的测定采用改良的IFCC (International Federation of Clinical Chemistry)方法，使用商用试剂盒。根据lowry法测定蛋白质浓度等¹⁷用紫外可见分光光度计(Systronic)测定，以g/dL表示。

道德的声明

在整个实验过程中，动物的使用和维护都是按照动物实验控制和监督委员会制定的指导方针进行的。印度德里。

统计分析

测定抗氧化剂血液中的酶活性以平均值±表示SE。采用方差分析分析对照组与处理组之间差异的统计学意义，采用SPSS软件25版进行Duncan事后检验。P <0.05认为差异有统计学意义。

结果

在本研究中，鲤的抗氧化能力的显著改变是剂量-持续方式。结果总结在1-7个图表中。鱼体血浆CAT活性显著(p < 0.05)抑制率为46.31%^th曝光日(图1)。暴露1 d的鱼与对照相比，微增1.12%，处理10 d和20 d的鱼与对照相比，分别显著减少17.25%和34.32%。

在抗粘多糖的作用下，血浆SOD活性显著升高63.21%^th曝光日。与对照相比，暴露1天的鱼增加了26.81%，暴露10天和20天的鱼分别显著增加了46.72%和50.75%(图2)。

血浆LPO活性在30时增加了64.73%^th曝光日。10 d和20 d分别增长了33.15%和50.48%。而暴露1天后，与对照组相比增加了1.16%(图3)。

亚致死浓度显示血浆GPx活性水平呈剂量依赖性下降。暴露1天的鱼的血浆GPx活性下降了0.13%(图4)，但与对照组相比，它的危害相对较小。结果表明，30时GPx活性下降幅度最大，达58.18%^th的一天。GPx活性在第10天和第20天分别较对照降低11.27%和26.54%。

与对照组相比，afidopyropen对ALP活性的影响(图5)更高。暴露1 d后，血浆ALP活性较对照升高2.08%。30^th暴露第1天的活度最高，达30.88%，暴露第10天和20天的活度分别比对照组高12.61%和21.29%。ALP水平随治疗时间的延长而显著升高。

尽管在30 ~ 30日，嗜假肌醇处理的鱼的ALT活性显著提高了62.97%^th的一天。暴露1天的鱼的增幅最小，为0.71%，与对照组相比差异不大(图6)。而暴露10天和20天的鱼的增幅分别为34.74%和51.85%，显著高于对照组。

此外，在30^th第30天，鱼的GGT活性最低，为59.95%。暴露1天的鱼显示血浆GGT活性轻微下降0.98%，与对照组没有太大差异。与对照组相比，暴露10天和20天的鱼的死亡率分别显著下降了9.82%和20.96%(图7)。蛋白质含量在处理1 d(1.56%)、10 d(16.62%)、20 d(26.58%)时均显著降低，30 d时逐渐降低^th日(57.27%)分别与对照组比较。

图1:嗜假肌醇对大鼠血浆CAT活性的影响鲤属carpio在0.2mg/L，不同的暴露时间，数据显示为平均值±SE每组6条鱼;与对照组和处理组比较，差异以字母符号表示(P<0.05)。 点击此处查看图

图2:阿非陀罗酮对大鼠血浆SOD活性的影响鲤属carpio在0.2mg/L，不同的暴露时间，数据显示为平均值±SE每组6条鱼;与对照组和处理组比较，差异以字母符号表示(P<0.05)。 点击此处查看图

图3:Afidopyropen对大鼠血浆LPO活性的影响鲤属carpio在0.2mg/L，不同的暴露时间，数据显示为平均值±SE每组6条鱼;与对照组和处理组比较，差异以字母符号表示(P<0.05)。 点击此处查看图

图4:Afidopyropen对大鼠血浆GPx活性的影响鲤属carpio在0.2mg/L，不同的暴露时间，数据显示为平均值±SE每组6条鱼;与对照组和处理组比较，差异以字母符号表示(P<0.05)。 点击此处查看图

图5:Afidopyropen对大鼠血浆ALP活性的影响鲤属carpio在0.2mg/L，不同的暴露时间，数据显示为平均值±SE每组6条鱼;与对照组和处理组比较，差异以字母符号表示(P<0.05)。 点击此处查看图

图6:阿陀罗酮对大鼠血浆ALT活性的影响鲤属carpio在0.2mg/L，不同的暴露时间，数据显示为平均值±SE每组6条鱼;与对照组和处理组比较，差异以字母符号表示(P<0.05)。 点击此处查看图

图7:嗜假肌醇对大鼠血浆GGT活性的影响鲤属carpio在0.2mg/L，不同的暴露时间，数据显示为平均值±SE每组6条鱼;与对照组和处理组比较，差异以字母符号表示(P<0.05)。 点击此处查看图

讨论

血液为研究动物毒理学效应提供了重要的资料。不同的血液参数经常发生变化，取决于应激条件和各种环境因素。某些酶的增加或减少取决于物种和外来生物的性质。在本研究中，预计抗氧化酶会形成一个抗氧化防御系统，在暴露于嗜核酰基丙烷下增加对ROS的解毒，酶是内在联系的，依赖于彼此的活性。

过氧化氢酶是一种抗氧化酶，有助于从过氧化氢中分离水和氧。它避免了细胞内过氧化氢的过量积累Jeeva等¹⁸。这种酶负责通过分解中和过氧化氢，确保细胞中分子的最佳水平，这对细胞信号活动也很重要等¹⁹。暴露第1天，鱼表现出通过增加CAT活性的防御机制。目前的研究表明，血浆CAT活性下降可能是由于对嗜酸性粒细胞毒性的解毒机制失效所致。第10、20天活性下降，第30天活性进一步下降^th暴露一天后，它显示出保护细胞抵抗嗜核细胞的活性降低。Vinodhini和Narayan也报道了类似的工作^20.他暴露了鲤属carpio重金属。在本研究中，嗜假纤维增强素降低了代谢率，从而导致CAT降低，而GGT酶活性在亚致死浓度时，CAT活性降低可能表明H清除失败₂O₂在亚致死浓度下ROS生成增加。

SOD是一种抗氧化剂，它的作用是防止细胞中活性物质的形成。它是一种关键的内源性抗氧化剂。这种酶有助于降低潜在的破坏性超氧阴离子对活细胞的危害伊戈达罗和阿金洛耶²¹。在这项研究中，血浆中SOD活性显著增加，这取决于暴露的持续时间，并导致鳃和肝脏损伤。维诺蒂尼和纳拉亚南^20.在重金属中毒组中，肝脏和肾脏中SOD水平在接触16天和32天后分别升高和降低，从而引发诱导反应。我们的结果包含了Abhijith的发现等²²据报道，SOD活性的显著增加导致这些酶渗漏到血浆中，对肝脏和鳃造成损害Catla Catla接触甲基对硫磷。这也反映了类似的发现，即在本研究中注意到的，afidopyropen增加血浆中SOD的活性，并表明通过增加其活性来抵抗毒性作用的防御机制本身的可能性。因此，SOD和谷胱甘肽水平可以被认为是氧化应激的指标。

MDA水平的升高或降低通常是估计脂质过氧化参数Rui的关键等²³，以及由杀虫剂和其他化学物质引起的细胞损伤的第一步²⁴。在本研究中，血浆中的丙二醛水平鲤属Carpio与对照相比，除1天暴露时间外，所有暴露时间均显着增加，暴露时间略有变化。Banaee也报告了类似的结果，等²⁵在Alburnus mossulensis，暴露于苯丙菊酯。经氯氰菊酯处理的淡水贻贝组血浆LPO水平也有类似的升高Elongatulus eucirrus由koprucu等²⁶而在鲤属carpio通过海接触敌敌畏等²⁷。血浆和肝脏LPO水平升高鲤属carpio目前的研究表明，MDA水平的失衡导致氧化应激。

谷胱甘肽过氧化物酶必须保护血液免受H₂O₂还能保护组织免受脂质过氧化造成的氧化损伤^20.。在目前的研究中，我们观察到暴露的鱼中GPx活性降低，导致组织损伤，我们的发现是一致的埃斯皮诺萨等²⁸当GPx活性降低时，细胞中会产生更多的过氧化氢，导致组织损伤。

碱性磷酸酶利用磷酸酶从分子中除去磷酸基团。Haghi, Banaee²⁹据报道，0.2 mg /L的微塑料暴露于鲤属carpio连续30天导致肝细胞膜损伤，以及其他消化和生殖器官因明显增加。在本研究中，鱼类表现出血浆ALP和ALT活性的增加(图5和6)，这可能是肝脏损伤的原因之一，因此。另外，Demerdash等^30.确定与酶渗漏相比是细胞损伤的结果。因此，有毒物质在细胞水平上破坏细胞膜功能，并常与细胞膜通透性增加有关。

在本研究中，GGT活性显著降低，在鲤属carpio用毒死蜱和聚乙二醇处理₂-NPs和百草枯哈塔米等³¹;Banaee等³²。蒙泰罗等³³;尤纳尔和萨金²⁴据报道，当某些生化过程被过量的底物减慢时，酶的活性会降低。因此，GGT活性的降低可能反映了暴露的鱼血浆中抗氧化系统的可能失效。蛋白质在生物体中很重要，它提供能量和蛋白质的分解，以减少外来生物对身体的毒性作用大卫等³⁴。在本研究中，蛋白质含量鲤属carpio明显下降。因此，与对照组相比，暴露的鱼显示出总蛋白质的减少。我们的结果包括Amin和Hashem³⁵他们报告说，蛋白质的减少会导致蛋白质合成的改变，从而导致ALT和AST活性的增加。

结论

酶负责催化细胞内的化学反应。如果化学物质干扰了生物系统，它会导致对细胞的严重损害，并且一种酶的活性失衡会导致异常的生理状况，减缓体内的生化活动，这可能是有害的。目前的研究表明，抗氧化酶的改变是鱼类不健康状态的见证鲤属carpio这些酶的变化是DNA损伤的根本原因。本研究极大地填补了科学文献中关于嗜核细胞的空白。

确认

作者感谢卡纳塔克大学动物学系主任允许他们进入实验室设施。

利益冲突

我声明这篇文章不存在利益冲突。

资金来源

作者发表这篇文章没有得到任何资金支持。

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